极速天气 资讯 国际期刊(影响因子6.073)发表!复星诊断全自动真菌药敏检测系统获认可

国际期刊(影响因子6.073)发表!复星诊断全自动真菌药敏检测系统获认可

近日,国际期刊《Frontiers in Cellular and Infection Microbiology》刊登了由北京协和医院检验科徐英春教授团队牵头开展的基于专利实时荧光技术开发的全自动真菌药敏检测系统Droplet48的性能评估研究报告,该报告验证了Droplet 48的重复性、药物报告浓度范围以及与参考试剂比对一致性并获得高度的认可。

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Droplet48是由复星诊断完全自主研发上市的全自动药敏检测系统,该检测系统基于专利的荧光技术动态检测真菌生长,绘制完整的真菌生长曲线,通过生长曲线特征进行真菌的药敏分析。

【检测原理】

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Fig2 Droplet48 全自动药敏检测系统原理. D48 工作模式图:D48实时监测含有不同浓度抗真菌剂的微稀释孔的荧光,并通过荧光强度随时间的变化拟合菌株的生长特性。如果抗真菌药物的浓度高于被测菌株的最低抑制浓度,与含有较低MIC的微稀释孔相比,菌株的生长特性发生了明显的变化。克柔氏念珠菌在不同浓度的伊曲康唑、卡泊芬净和两性霉素B的作用下的生长特性。检测过程中会有一些物质干扰荧光信号。根据之前积累的菌株生长数据,通过排除背景信号并加入不同的修正算法,最终得到了这些抗菌药物的MIC值。黑体和红色数字表示抗真菌剂的MIC和阳性报告时间。

【研究设计】

1、真菌菌株

144株来自临床常见系统性感染真菌菌株,分别是16株白色念珠菌,16株克柔氏念珠菌,13株热带念珠菌,13株近平滑念珠菌,13株葡萄牙假丝酵母菌,10株光滑假丝酵母菌,10株季也蒙念珠菌和10株新生隐球菌,还有11株阿萨希毛孢子菌,22株皮炎外瓶霉,以及11株来自于随机从罕见的血流感染患者中分离培养出来的菌株。所有菌株都是从血液或其他无菌身体部位分离培养出来的。

2、抗真菌药敏实验

将所有菌株在沙保乐葡萄糖琼脂或马铃薯葡萄糖琼脂上进行传代培养,并再次传代培养,以确保菌株的纯度和活力,然后分别按照D48和Sensititre YeastOne 操作要求进行9种药物的药敏实验,9种药分别是:氟康唑,伏立康唑、 伊曲康唑、泊沙康唑、卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净、两性霉素B和5-氟胞嘧啶。

3、数据分析

临床折点和流行病学界值依据2022 CLSI文件 M57S第四版和M27M44S第三版作为判定标准。根据CLSI 指南M52文件,分析D48和SYO两种方法学一致性包括基本一致性和分类一致性。EA:试验方法D48的MIC值与参考方法SYO的MIC值上下相差不超过2个稀释度;CA: 试验方法药敏结果与参考方法判断结果同一类的百分比。

【研究结果】

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1. 重复性100%:D48在±2稀释范围内的重复性为100%;

2. 药物浓度梯度:D48的药物浓度梯度更多,可以同时检测96个不同浓度的药物,符合中国临床真菌分离物检测需要;

3. 总样本的基本一致性EA除泊沙康唑为86.62%外,其余药物EA均大于90%;总样本分类一致性CA除伏立康唑为87.93%外,其余药物CA均大于90%。

那么D48应对“超级真菌”表现如何?

徐教授研究团队采用11 株分离于临床血液中的不常见真菌菌株,同时用D48和SYO进行真菌药敏实验,结果发现D48除了粘液毛孢子菌的卡泊芬净和泊沙康唑、挪威假丝酵母菌的阿尼芬净、酿酒酵母菌的两性霉素B和氟康唑的MIC值与SYO的差异大于2个稀释度,其他的均与SYO的基本一致性EA达到100%。

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【研究结论】

Droplet48基于致病性真菌生长特性,用于快速测定真菌菌株的抗真菌药敏谱。Droplet48为临床提供了新的真菌药敏检测方案,与目前广泛使用的商业方法相比,更加自动化;与传统方法相比,可更快地提供结果和解释。

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